Кровь при свободном стекании собирается в коллекторную микропробирку для последующего получения сыворотки.
В направлении на анализ при взятии биожидкостей необходимо указать:
1) отделение;
2) фамилию врача, затребовавшего анализ;
3) данные пациента (Ф.И.О., возраст, пол, стационарный или амбулаторный больной, номер истории болезни, предполагаемый диагноз);
4) дату и время взятия крови или мочи;
5) цель исследования.
Направление на анализ подписывается врачом.
Полученная биожидкость должна быть доставлена в лабораторию как можно быстрее (табл. 15). Пробирки не следует заполнять до краев. Пробирки должны быть закрыты крышками. Цельную кровь, полученную без антикоагулянтов, не следует помещать в холодильник до доставки в лабораторию во избежание гемолиза.
Центрифугирование производится не позднее чем через 1 ч после взятия биожидкости.
Приготовление сыворотки и плазмы выполняет лаборант.
Сыворотку получают из спонтанно свернувшейся цельной крови. Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается в ней при комнатной температуре (15–25 °C) 30 мин до полного образования сгустка или помещается в термостат при температуре 37 °C на 15 мин. Затем стеклянной палочкой осторожно проводят по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем слое крови для отделения сгустка от стенок. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку и центрифугируют либо центрифугируют в тех же первичных пробирках при 1,2 оборота в минуту в течение 10 + 5 мин.
В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 6-15 тыс. оборотов в течение 1,5 мин. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные пробирки.
Таблица 15. Требование по времени выполнения некоторых преаналитических этапов для биохимических исследований
Венозную кровь, полученную с гепарином (0,75 мг/мл), немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Если плазму нужно получить из капиллярной крови, собранной в микропробирки с ЭДТА (1 мг/мл), то после взятия крови содержимое пробирки перемешивают осторожным переворачиванием не менее 10 раз. Смешивание можно проводить и качательными движениями. Перемешивание должно осуществляться без встряхивания и пенообразования.
Пробирки с кровью центрифугируют при 1000–1500 оборотах в течение 10–15 мин. Плазму немедленно сливают во вторичные центрифужные пробирки.
Доставка крови в клинико-диагностическую лабораторию для определения электролитов, газов крови и системы гемостаза
Правила подготовки обследуемых, взятие и условия хранения и доставки материала для проведения исследований в КДЛИсследование кислотно-основного равновесия и газов крови
В качестве биоматериала для определения кислотно-основного равновесия и газов крови предпочтительны артериальная и артериализированная капиллярная кровь. Материал должен быть взят в анаэробных условиях для исключения газообмена с окружающим воздухом. В шприце или капилляре с кровью не должно быть пузырьков воздуха.
Взятие производится из лучевой, локтевой, бедренной и других артерий шприцем или через катетер, находящийся в артерии; артериализированной капиллярной крови – из мочки уха или пятки в капилляры. Взятие артериальной крови из артерии осуществляет врач, артериализированной капиллярной крови – медсестра.
Антикоагулянт используется в жидкой или сухой форме. Жидкий гепарин легко смешивается с кровью, но его использование в шприцах может приводить к ошибкам, связанным с разведением крови. Сухой гепарин несколько медленнее смешивается с кровью, чем жидкий. У лиофилизированного гепарина этого недостатка нет. В случаях одновременного определения газов крови и электролитов в цельной крови рекомендуется использовать забуференный раствор гепарината лития с конечной концентрацией, соответствующей 8—
МЕ/мл крови для стеклянных и 4–6 МЕ/мл для пластиковых сосудов.
Взятие крови можно производить и в стеклянные, и в пластиковые шприцы (но в пластиковых исследование должно быть проведено в течение 5 мин).
В стерильный стеклянный шприц на 5-10 мл с помощью отдельной иглы набирают 100 мкл стерильного раствора гепарината лития с активностью 12–30 МЕ/мл, при этом внутренние стенки шприца полностью смачиваются гепарином при оттягивании поршня, насаживают на шприц иглу, направляют шприц с иглой вверх и выпускают раствор гепарина.
В асептических условиях пунктируют лучевую артерию. После взятия крови одновременно вытягивают иглу и шприц. Шприц закрывают пробкой и содержимое его перемешивают между ладонями. Если исследование не может быть выполнено в течение 5 мин, закупоренный шприц с кровью помещают в стакан с водой и с кусочками льда не более чем на 1 ч для стеклянного шприца и на 30 мин – для пластмассового. До проведения измерения после ледяной бани шприцы с кровью выдерживают при комнатной температуре в течение 10 мин. Перед измерением кровь перемешивают переворачиванием шприца 10 раз и горизонтальным вращением в течение 10 с.
При взятии крови через артериальный катетер первую порцию крови, равную 3 объемам системы катетера до места взятия крови, удаляют.
Артериализированную капиллярную кровь получают из мочки уха. Мочка уха смазывается со всех сторон финалгоновой мазью. Через 10 мин мазь стирают салфеткой, мочка уха промывается 70 %-ным спиртом, вытирается насухо стерильной салфеткой. Стерильным скарификатором, конец которого смочен стерильным гепарином, делают прокол глубиной 3–5 мм на нижней внешней поверхности края мочки уха. Каплю крови удаляют, на рану наносят 1 каплю раствора гепарината лития. Следующие 3 капли крови не используются и стираются. Затем в образующуюся следующую каплю крови вводят первый капилляр, избегая попадания пузырьков воздуха. Мочку уха нельзя массировать и сдавливать.
Кровь должна течь свободно в капилляр, ее не собирают с кожи. После взятия крови один конец капилляра закрывается крышкой, в капилляр помещается металлический штифт («блошка»). Капилляр закрывают крышкой или замазывают замазкой с другого конца. По капилляру из конца в конец 5 раз проводят магнитом для перемешивания крови. Как правило, кровь берут в 2 капилляра, объем крови на исследование составляет 0,15 мл.
Если анализ не выполняется тотчас после взятия крови, загерметизированные стеклянные капилляры с кровью немедленно помещают в сосуд со льдом не более чем на 1 ч.
При хранении во льду за 10 мин до анализа капилляр с кровью нужно выдержать при комнатной температуре. Перед анализом кровь повторно перемешивают в течение 5-10 с.
Перед введением крови в анализатор металлический штифт удаляют из капилляра.
Исследования системы гемостаза
Взятие венозной крови проводит медсестра, капиллярной крови – лаборант.
