а – число сосчитанных эритроцитов.
В результате сокращения Х = а х 10 000.
Причины ошибок при подсчете эритроцитов:
1) неточность при взятии крови в пипетку;
2) неудовлетворительная градуировка пипеток;
3) образование сгустка крови;
4) неправильное притирание покровного стекла камеры или недостаточная его толщина (менее 0,3 мм);
5) подсчет производят сразу после заполнения камеры, когда клетки еще не успели осесть на дно;
6) плохо вымытые и недостаточно высушенные пипетки и пробирки;
7) недоброкачественность реактивов, вызывающих гемолиз;
8) любое отклонение от правил подготовки камеры, ее заполнения и подсчета клеток.
Метод автоматического подсчета эритроцитов с помощью счетчиков и гематологических анализаторов облегчает выполнение этого исследования и делает его более производительным.
Унифицированная методика автоматического подсчета эритроцитов
При работе с гематологическими счетчиками подготовка пробы (разведение) осуществляется вручную. При использовании гематологических анализаторов отбор пробы крови и ее обработка происходят без участия лаборанта.
Принципы работы
Принцип работы большинства анализаторов основан на кондуктометрическом методе: определенное количество разведенной изотоническим раствором натрия хлорида или другого электролита крови пропускается через микроотверстие, проходящая через него клетка увеличивает сопротивление между электродами, и возникающий импульс передается на счетное устройство с цифровой индикацией.
Ход исследования
Ход исследования выполняется в соответствии с инструкцией, прилагаемой к анализатору.
Нормальные величины
Количество эритроцитов в крови здорового человека составляет, по данным А. И. Воробьева, у мужчин – 4,0–5,1 Т/л, у женщин – 3,7–4,7Т/л.
Клиническое значение
Снижение количества эритроцитов (эритроцитопения) является одним из основных критериев анемического синдрома. От истинный анемии необходимо отличать гидремию, связанную с увеличением объема плазмы за счет притока тканевой жидкости. Причинами анемии являются кровопотери, нарушения кроветворения в костном мозге и повышенный гемолиз. Кроме того, уменьшение количества эритроцитов имеет место при лейкозах, множественной миеломе, неходжкинских лимфомах, системной красной волчанке, ревматоидном артрите, метастазах злокачественных опухолей и др. Уменьшение количества эритроцитов наблюдается также при недостаточном содержании белка в пище, голодании, вегетарианской диете.
Увеличение количества эритроцитов в единице объема крови называется полиглобулией или эритроцитозом. Причины эритроцитозов представлены в таблице 20.
Таблица 20. Увеличение количества эритроцитов в единице объема крови
В клинической практике морфологию эритроцитов обычно исследуют в окрашенных мазках крови.
Окраска эритроцитов
Эритроциты окрашиваются кислыми красителями в розовато-красный цвет. Степень оксифилии клетки обусловлена присутствием гемоглобина и его количеством. Эритроциты здоровых людей имеют равномерную окраску и небольшое просветление в центре (нормохромия). Бледная окраска эритроцитов с широкой неокрашенной центральной частью называется гипохромией. Гипохромия эритроцитов обусловлена низким содержанием гемоглобина в эритроцитах и чаще характерна для дефицита железа, но также имеет место при свинцовом отравлении, талассемии. Гипохромия обычно сочетается с микроцитозом.
Выделяют три степени гипохромии:
– 1 (+) – просветление в центре несколько больше нормы;
– 2 (++) – окрашенная часть представлена в виде узкой ленты;
– 3 (+++) – окрашенная часть представлена в виде очень узкого кольца.
Усиленная окраска эритроцитов называется гиперхромией, обусловлена увеличением объема эритроцитов и обычно сочетается с макрои мегалоцитозом.
Анизохромия – различная интенсивность окрашивания отдельных эритроцитов или участков одного эритроцита, часто встречается при железодефицитной анемии.
Полихроматофилия – недостаточное накопление гемоглобина в эритроцитах с остатками базофильной субстанции. Незрелый эритроцит воспринимает и кислую, и щелочную краску и окрашивается в цвет от синего до серовато-розового. В норме встречаются единичные полихроматофильные эритроциты. Число их может увеличиваться при усиленном эритропоэзе постгеморрагические, гемолитические анемии.
Выделяют три степени полихромазии:
1) Р1+ – единичные полихроматофилы через каждые 2–3 поля зрения;
2) Р2++ – 1–4 полихроматофила в каждом поле зрения;
3) Р3+++ – более 10 полихлорматофилов в каждом поле зрения.
При морфологическом исследовании эритроцитов необходимо определить наличие в мазке патологических форм эритроцитов или включений в эритроцитах. Эритроциты с ядром – нормобласты, эритробласты – встречаются при самых разнообразных состояниях. Наиболее высокая степень содержания нормобластов имеет место при гемолитической анемии в момент гемолитического криза, при хроническом миелофиброзе, метастазах злокачественных опухолей в костный мозг.
Включения
При В12-дефицитной анемии и после спленэктомии встречаются эритроциты с остатками ядер в виде колец Кебота, телец Жолли, пылинок Вейденрейха.
Тельца Жолли – остатки ядерного хроматина округлой формы размером 1 мкм и более в количестве от 1 до 3 в эритроците, красно-фиолетового цвета. Кольца Кебота – остатки ядерной оболочки в виде тонких, нитеобразных колечек, окрашенных в красный цвет.
Пылинки Вейденрейха – остатки ядерного вещества розового, иногда голубого цвета, встречаются при тяжелых анемиях, главным образом – мегалобластных. Тельца Гейнца – Эрлиха представляют собой обычно одно круглое включение (реже 2–3) размером 1–2 мкм, располагающееся по периферии эритроцита. При обычной окраске по Романовскому они не видны. Определяют их по методике Дейге с метиловым фиолетовым. Тельца при этом окрашиваются в пурпурно-красный цвет. Появление телец Гейнца – Эрлиха является доказательством тяжелого токсического повреждения веществами, окисляющими гемоглобин (нитробензол, анилин, нитроглицерин, сульфаниламидные препараты) и приводящими к гемолизу.
Эритроцитометрия (измерение диаметра эритроцитов)
Унифицированная микроскопическая методика измерения диаметра эритроцитов с помощью окуляр-микрометра в окрашенном мазке крови.
Клиническое значение
Сдвиг эритроцитометрической кривой влево чаще имеет место при железодефицитных анемиях, микросфероцитозе, талассемии, свинцовом отравлении. Сдвиг эритроцитометрической кривой вправо наблюдается при B12– и фолиеводефицитной анемиях, алкоголизме, диффузных поражениях печени.
