Проблема заключалась в том, что применявшиеся методы не позволяли отличать нормальные гены Src от онкогена: немного более короткая версия этого гена (онкоген) выглядела так же. Джон Майк Бишоп и Гарольд Вармус решили эту проблему и в 1989 г. получили Нобелевскую премию за свою работу. Я присутствовала на их чествовании в лаборатории в Колд-Спринг-Харбор. Майкл был в смокинге и держал в руках рукопись – обычно для обсуждения она никогда не была ему нужна. Вармус (который, насколько я помню, приезжал на все мероприятия, проводившиеся в Европе, на велосипеде и был настолько мокрым, что хоть выжимай) выглядел энергичнее большинства присутствовавших! Они вдвоем пришли ко мне в лабораторию в Обществе Макса Планка (Берлин) и спрашивали о диких кабанах на территории охотничьего замка Грюневальд, упомянутого в путеводителе, – раньше мне никогда не задавали таких вопросов. Питер Фогт из Лос-Анджелеса, поставлявший вирус саркомы Рауса, тоже внес свой вклад в исследования. Кроме того, берлинец Питер Дюсберг вместе со Стивом Мартином (в настоящее время оба работают в Беркли), проведя важный эксперимент, показали, что генетически модифицированный инактивированный Src не вызывает развития опухоли. Это стало последним весомым доказательством того, что Питер Дюсберг – адвокат дьявола и всегда придерживался точки зрения, противоположной мнению научного сообщества (всегда напоминал Мефистофеля из «Фауста» Гёте). Он неоднократно оказывался прав, но жестоко ошибся, когда отверг идею о том, что ВИЧ является причиной СПИДа. Я помню, как он говорил это нескольким сотням слушателей во время подиумных обсуждений в Университете им. Гумбольдта в Берлине. Я считала эту точку зрения опасной и вводящей в заблуждение. Мы с ним не раз устраивали научные дискуссии, никогда не приходили к общему мнению, но всегда оставались друзьями.
Вирусные онкогены, не содержащие вирусов, – парадокс?
Ретровирус может вызвать развитие рака даже при отсутствии онкогена. Интеграция ДНК провируса в клеточный геном чрезвычайно опасна для клетки. Где бы такая интеграция ни происходила, она происходит случайным образом и может обусловить «генотоксический» эффект, повреждая гены, ДНК. К числу наиболее значимых факторов развития рака относятся, в частности, нездоровый образ жизни и факторы среды, в том числе курение, алкоголь, действие ядовитых веществ, выхлопные газы, заражение, радиоактивность (хотя в настоящее время этот фактор считается менее опасным, чем ранее), дым из труб. Многие трубочисты умерли от рака яичек – так впервые были выявлены «средовые» канцерогены. Относительно недавно было установлено, что некоторые бактерии, населяющие желудок, являются потенциальными канцерогенами. Мы до сих пор не знаем всех факторов. Кроме того, пока неизвестна роль следующих факторов: время воздействия, дозозависимость и комбинация факторов.
Благодаря онкогенным вирусам мы поняли, как под действием онкогенов развивается рак. Как это ни парадоксально, но лучше всего исследованными ДНК-онкогенными вирусами являются вирусы животных, которые обычно у человека не вызывают развитие заболевания, – Simian virus 40(SV40) и Polyoma virus (PY). Обычно эти вирусы не ассоциируются с раком у человека, и все же оба очень важны для понимания молекулярных механизмов злокачественных перерождений. Наш выбор объяснялся просто: у нас была качественная клеточная культура и животные системы. Кроме того, благодаря этим вирусам мы определили, что они вызывают развитие рака только в редких случаях в так называемых непермессивных клетках, где вирус не реплицируется, а скорее, интегрирует свои геномы в клетку-хозяина. В пермиссивных клетках вирусы реплицируются и оказывают лизирующее действие на клетки, высвобождая потомство – вирусные частицы, не индуцируя при этом развитие рака. Интеграция в непермессивные клетки опасна и может вызвать рак в клетках животных. Кроме того, интеграция является признаком онкогенности ретровирусов даже при отсутствии онкогена, и тогда медиаторами этого процесса являются «мощные» промоторы – LTR-последовательности, которые обычно обеспечивают экспрессию вируса, но могут добраться и до соседних генов и внести путаницу в их экспрессию. Сверхэкспрессия или дерегулирование генов может привести к некорректной дозировке или активации в несоответствующий момент времени. Это явление называется «вставочный мутагенез» или «даунстрим-стимулирование». Только недавно было установлено, что в нашем геноме находится большое количество вирусных промоторов – одиночных LTR-последовательностей, которые являются «остатками» после встраивания ретровирусов в наш геном, произошедшего примерно 100 млн лет назад! В нашем геноме содержится около 0,5 млн таких одиночных LTR-последовательностей – остальная часть вируса утеряна. Звучит немного угрожающе, и в настоящее время ученые задаются вопросом, сохранили ли эти последовательности способность вызывать рак. Наши клетки могут им противостоять и подавлять их активность, особенно на этапе эмбриогенеза, для защиты следующего поколения. Достаточно ли этого?
А сейчас подойдем к настоящему парадоксу: когда исследователи изучали раковые клетки человека, многие онкогены, известные ученым из исследований ретровирусных онкогенов (v-онк), были выявлены в раке человека, но без каких бы то ни было признаков онкогенных вирусов. Звучит странно, но этому есть простое объяснение: обычно опухолевые клетки растут быстрее нормальных независимо от стимула и от того, что инициирует такой рост, – химические канцерогены, сигаретный дым, генетические нарушения, нездоровый образ жизни, вирусные онкогены или вирусные промоторы. Таким образом, любой мутировавший клеточный ген может усилить клеточный рост, а это – признак рака. Но значение имеет результат, а не причина (не вирус!).
Вирусы и рак
Вирусы могут способствовать развитию рака, но они никогда не действуют в одиночку.
Выделяется шесть далеких друг от друга семейств вирусов, которые могут быть задействованы в развитии рака у человека. Примерно в 15–20% случаев рака у человека вирусы являются «кофакторами» – слово, которое нужно подчеркнуть.
Эти вирусы включают редкий ретровирус, Т-лимфотропный вирус человека типа 1 (HTLV-1, имеющий дальнее родство с ВИЧ), вирус гепатита В (HBV, параретровирус) и вирус гепатита С (HCV, РНК вирус) – оба вызывают рак печени; два вируса папилломы человека (ВПЧ), которые индуцируют рак шейки матки и другие виды рака половых органов; герпесвирусы, в частности вирус Эпштейна–Барр (ЭБВ), который участвует в развитии двух видов опухолей – лимфомы Беркитта (ЛБ) в Африке и назофаренгеальной саркомы носа в Китае (ЭБВ также является возбудителем мононуклеоза, который не является раком); а также вирус саркомы Капоши (он еще называется вирусом герпеса человека 8, HHV-8).
ВИЧ не относится к канцерогенным вирусам, но в сочетании с другими вирусами и факторами опосредованно повышает риск развития рака. HTLV-1 – единственный известный ретровирус человека, вызывающий рак. Этот эндемический вирус из Японии может индуцировать скоротечное заболевание – Т-клеточный лейкоз взрослых (ТКЛВ), а в Африке – тропический спастический парапарез (TSP). Японский вирус передается с молоком матери, и его распространения можно без труда избежать, если вести среди кормящих женщин просветительскую работу и постараться убедить их отказаться от грудного вскармливания. У этого вируса есть один особенный ген Taх, который не относится к клеточным генам, как другие онкогены, хотя и ведет себя так же: это транскрипционный активатор, который активирует клеточные гены, что приводит к образованию «химической петли», состоящей из какого-либо фактора роста и его рецептора. Такая комбинация стимулирует клеточный рост. Считается, что Тах играет определенную роль в развитии опухоли яичек – доброкачественной опухоли у молодых мужчин, которая часто выявляется у призывников во время медицинского осмотра. Прочие вирусы лейкемии встречаются у животных, например у овец, коров и мышей. Были проведены широкомасштабные исследования гормонзависимого вируса опухоли молочной железы мышей, но его не выявили в опухоли молочной железы у человека. Работа по поиску доказательств его существования зашла настолько далеко, что Сол Шпигельман из Нью-Йорка опубликовал шкалы с делением, равным 10 минутам (вместо стандартного деления, равного 1 минуте), чтобы результаты его поисков казались более впечатляющими. Возможно, он надеялся, что этого никто не заметит. Но все заметили! Насколько нам известно, онкогенного вируса, вызывающего рак молочной железы у человека, не существует.
