При работе с пятнами малых размеров в реакции электропреципитации можно использовать ниточки из пятен крови размерами 0,1 × 0,1 см.
Постановка реакции преципитации в жидкой среде: в конические пробирки с соответствующими надписями помещают вытяжки из пятен крови, антиген и изотонический раствор натрия хлорида. В каждый объект исследования наслаивают преципитирующую сыворотку, чтобы отношение антигена и антитела составляло 1:10. Наблюдение ведут в течение часа, отмечая время появления преципитата. Положительным результатом реакции считается выпадение колец преципитата в пробирках с вытяжками из пятен крови и в пробирках с антигенами при отсутствии таковых в пробирках с вытяжками из предмета-носителя и физиологического раствора.
Техника проведения реакции электропреципитации заключается в следующем: расплавленный 1-процентный агаровый гель выливают на стеклянную пластинку, равномерно распределяя по всей площади, охлаждают, дают подсохнуть и уплотниться в течение 10–15 мин. Далее в геле пробивают стандартным пробойником по два параллельных ряда отверстий диаметром 0,3 см по трафарету, расположенному под пластинкой. Гель из отверстий удаляют препаровальной иглой. В отверстия одного ряда помещают преципитирующие сыворотки, в отверстия второго ряда – вытяжки из следов крови или ниточки с кровью. Таким же образом вводят контрольные участки предметов-носителей.
Положительный результат электропреципитации с одной сывороткой контролируют отрицательным результатом с двумя другими преципитирующими сыворотками. При отрицательном результате со всеми вышеуказанными сыворотками реакцию проводят дополнительно с другими преципитирующими сыворотками. Разделение исследуемых объектов производят на универсальном приборе для электрофореза при напряжении 250–300 V, силе тока 30–32 мА и комнатной температуре в течение 20–35 мин. Пластину сохраняют во влажной камере и результаты учитывают в течение суток.
Следующий этап работы эксперта – это определение групповой принадлежности крови. Обычно начинают с последовательного исследования образцов крови проходящих по делу лиц по системе АВО, присланных в жидком или высушенном виде на (марле).
Исследование образцов жидкой крови проходящих по делу лиц по системе АВО в судебно-медицинской экспертизе мало чем отличается от исследования таковой в клинике. Принцип исследования следующий: эритроциты изучаемой крови испытываются стандартными группоспецифическими сыворотками анти-А и анти-В. Сыворотка крови исследуется со стандартными эритроцитами группы А и В. В итоге группоспецифические сыворотки открывают искомые антигены, а стандартные эритроциты – соответствующие агглютинины. Далее приступают к определению групповой принадлежности следов крови на вещественных доказательствах по системе АВО, чаще всего используя реакцию абсорбции-элюции (РАЭ). Суть этого метода заключается в следующем: в первой фазе реакции-абсорбции к пятну крови добавляют стандартную группоспецифическую сыворотку. Агглютинины этой сыворотки абсорбируются соответствующим антигеном крови. Потом охлажденным физиологическим раствором проводят отмывание в целях удаления свободных неабсорбированных антител. При этом не нарушается возникшая взаимосвязь антигена пятна крови с антителами. Во второй фазе реакции абсорбции-элюции производят разделение образовавшегося комплекса «антиген-антитело» путем нагревания, в результате которого происходит разрушение связи антигена с антителами и, соответственно, выход абсорбированных ранее антител в соответствующую жидкую среду. Характер элюированных антител устанавливают по агглютинации в препаратах с контрольными участками предметов-носителей. Допустим, агглютинация стандартных эритроцитов группы В (при отсутствии агглютинации стандартных эритроцитов группы А) говорит, что в исследуемом объекте (пятне крови) имеется антиген В и отсутствует антиген А. В настоящее время для определения антигенов системы АВО гораздо реже используют реакцию абсорбции в количественной модификации и еще реже – реакцию смешанной агглютинации.
Учитывая, что диагноз группы крови ставится в первую очередь на основании выявленных антигенов, определение антител (агглютининов) является дополнительным методом, но, при достаточных размерах пятна, всегда обязательным. Наиболее распространенным является метод покровного стекла по Ляттесу. Суть метода в следующем: кусочки из пятна крови помещаются на 3 предметных стекла, слева – буква «А», справа – буква «В», на третьем стекле – букв
а «О». Далее к каждому кусочку добавляют по несколько капель стандартных эритроцитов соответственно надписи на стеклах групп А, В, О. Препараты помещаются во влажные камеры. Исследование проводят под микроскопом каждые 15–30 мин до подсыхания препарата. Например, при встрече агглютинина с одноименным агглютиногеном эритроцитов (анти-А с А) происходит склеивание (агглютинация) последних. При разноименных агглютинине и агглютиногене эритроцитов (например, анти-А и В) последние остаются свободными. Чтобы исключить ложную агглютинацию, в реакцию вводят эритроциты группы О, которые при истинной агглютинации всегда остаются несклеенными.
В случае если исследуемых лиц, одногруппна по системе АВО, эксперт обязан провести дифференцирование следов крови по другим эритроцитам (MNSs, резус, Lewis, Рр) либо сывороточным (eJm, Нр) системам. Способы выявления групповых факторов по данным системам известны – это реакции абсорбции-элюции, абсорбции-ингибиции, торможения агглютинации, а также электрофоретические методики.
Глава 5
Шерлок Холмс и криминальная антропология
Рембрандт. «Урок анатомии доктора Деймана» (1656)
В рассказе «Морской договор» Шерлок Холмс рассуждал о системе измерений Альфонса Бертильона и бурно восхищался этим ученым, что совершенно неудивительно, ведь конец XIX столетия характеризуется развитием криминальной антропологии и использования ее методов не только для расследования преступлений, но и для идентификации личности преступника.
Альфонс Бертильон (1853–1914) – французский антрополог и криминалист, предложивший систему судебной идентификации личности. Способ Бертильона включал 11 измерений (черепа, среднего пальца, мизинца, носа), словесный портрет, фотографию, обозначение цвета радужной оболочки глаза и формы волос и описание особых примет.
При описании лондонских преступников Шерлок Холмс нередко использует термины, применяемые представителями школы криминальной антропологии.
Развитие судебной медицины во второй половине XIX столетия проходило под влиянием европейской криминально-антропологической школы, широко распространенной в Европе середины – конца XIX в. Первым ученым, заметившим ряд выраженных анатомических особенностей в строении как тела, так и зубов у слабоумных и идиотов, был Морель, который в середине XIX в. отмечал, что они настолько отступают от средних норм, что не могут быть отнесены к индивидуальным вариантам.
Итальянский психиатр Ч. Ломброзо, основываясь как на своих собственных наблюдениях, так и на трудах Мореля, положил начало новой отрасли биологии – криминальной антропологии.
