При исследовании обстоятельств инфицирования людей было установлено, что комната отдыха, в которой была оставлена на ночь купленная сдоба, отделена от лаборатории, и в нее нельзя попасть, не зная секретного кода. Две коробки сдобы содержали черничные оладьи и набор пончиков.
У 12 сотрудников, которые ели пончики и оладьи, появилась диарея с лихорадкой, головная боль или рвота. Из них 11 признаны как больные, а один рассматривался как сомнительный случай. Средний возраст заболевших сотрудников составил 41 год (возрастной интервал 33–52 года), 9 из них (75 %) — женщины. Все заболевшие сообщили, что ели мучные кондитерские изделия между 7.15 ч утра и 1.30 ч пополудни 29 октября Один сотрудник не ел выпечку на работе, но взял ее домой и съел совместно с семьей около 19 ч. Диарейный синдром у сотрудников лаборатории проявился за период с 21 ч до 4 ч утра 1 ноября (рис. 1.55).
Рис. 1.55 Случаи шигеллеза в 1996 г. среди работников Техасского медицинского центра, начавшиеся с диарейного синдрома. Динамика появления больных характерна для эпидемиологии «точечного источника», предполагающей контакт с возбудителем в одно и то же время. Кружками обозначены случаи болезни. Подтвержденные бактериологически окрашены в черный цвет. Квадратом показан сомнительный случай. Указанны даты начала болезни. По S. A. Kovalic et al. (1997)
Средний инкубационный период составил 25 ч (интервал: 11–66 час). Ему предшествовали тошнота, ощущение дискомфорта и переполнения в эпигастральной области. Пять сотрудников, обратившихся в отделение «Скорой помощи», вскоре были отпущены домой, четверо других были госпитализированы (средний срок госпитализации составил 4 суток; интервал 2—10 суток). Восьми заболевшим сотрудникам внутривенно вводились жидкости. Культуры из стула были получены у 11 больных; в 8 культурах была обнаружена S. dysenteriae типа 2, 3 культуры были негативными. Поденные изоляты S. dysenteriae оказались чувствительными ко всем антибиотикам, использованным в тестах на чувствительность. Одиннадцать больных лечили ципрофлоксацином, один принимал гомеопатические средства.
Смертельных исходов среди заболевших сотрудников не было. Однако эффективность атаки составила 100 %. Все 12 человек, которые ели оладьи, заболели. Напротив, 33 человека, не употреблявшие в пищу эти оладьи, а только пончики, остались здоровыми. Питание в кафетерии госпиталя и посещение общественных собраний в течение недели с 25 по 31 октября также не были связаны с повышенным риском развития болезни.
Исследователи не зафиксировали случаев вторичной передачи болезни, но члены семьи одного сотрудника все же заболели после того, как съели оладьи, которые он принес им из комнаты отдыха персонала. Этот сотрудник сам съел только несколько кусочков и заболел. Из его стула и стула членов его семьи получена культура S. dysenteriae типа 2.
При проверке лабораторных запасов различных референс-культур микроорганизмов, включающих S. dysenteriae типа 2, установлено, что все они хранились в низкотемпературном хранилище Центра и находились в Wicrobank-бутылочках. Каждая бутылочка имела 25 пор со специальными бусинками, которые были импрегнированы микроорганизмами. Культуры S. dysenteriae типа 2 включались в банк на протяжении 1980-х гг. На момент расследования вспышки было обнаружено только 19 бусинок, хотя они никогда не использовались в работе.
Инфицирующая доза не была установлена, однако исследователи предположили, что для того, чтобы вызвать шигеллезную инфекцию у людей, требуется от 10 до 100 микроорганизмов.
Штоковые культуры S. dysenteriae типа 2 хранились в Медицинском центре много лет, и их точное происхождение не известно. Однако они не были серийно полученными культурами. Культуры могли быть выделены от больных и ранее использоваться для развития навыков работы с микробными культурами у медицинского персонала. Ни одного случая шигеллеза, вызванного S. dysenteriae типа 2, за последние пять лет в лаборатории госпиталя зарегистрировано не было. Не проводились и исследования этого микроорганизма.
Следовательно, нельзя объяснить возникновение этой вспышки грубой лабораторной ошибкой. Контаминация оладий во время покупки также исключена. Не описаны вспышки болезни, вызванные S. dysenteriae типа 2, ни в Техасе, ни в любом другом штате США.
Исследование выделенных штаммов возбудителя дизентерии Шмидца. S. dysenteriae типа 2 выделена фактически в чистой культуре из бульона обогащенной культуры, полученной из образцов оладий. Эта же шигелла была выделена из стула 8 больных. Обе культуры S. dysenteriae типа 2 по культурально-морфологическим и серологическим свойствам соответствовали референс-культуре Медицинского центра.
С помощью пульс-электрофореза обнаружено, что штоковые культуры по рестриктам ДНК неотличимы от культур, полученных из стула больных людей и из оладий, но отличались от двух изолятов S. dysenteriae того же типа, выделенных в других округах Техаса в 1995 и 1996 гг. и не причастных к данной вспышке. От тех штаммов, которые вызвали вспышку болезни среди персонала Центра, они отличались более чем по пяти полосам (рис. 1.56).
Рис. 1.56. Результаты пульс-электрофореза рестрикционных переваров ДНК из изолятов S. dysenteriae. Xbal-рестрикты ДНК-изолятов S. dysenteriae типа 3: дорожки 1–5 (панель А); ДНК-изолятов S. dysenteriae типа 2 [золяты от заболевших сотрудников, дорожки 6, 8—15 (панели А. Б); ДНК госпитальной штоковой культуры, дорожка 7 (панель А); ДНК-изолятов из сдобной булки, дорожки 17,18 (панель Б); и ДНК-изолята, не относящегося к данной вспышке, дорожка 16 (панель Б). Notl-рестрикты ДНК из изолятов S. dysenteriae типа 3: дорожки 27–31 (панель В); ДНК S. dysenteriae типа 2: госпитальная штоковая культура, дорожки 19, 23, 32, 34, 36 (панели Б, В); ДНК-изолятов из сдобной булки, дорожки 25, 26 (панель Б); и ДНК-изолята, не относящееся к данной вспышке, дорожка 24 (панель Б). По S. A. Kovalic et al. (1997)
Результаты пульс-электрофореза рестрикционных переваров ДНК из изолятов S. dysenteriae подтвердили «невозможную эпидемиологию» вспышки шигеллеза среди работников Техасского медицинского центра — источником S. dysenteriae типа 2, послужила штоковая культура, хранившаяся в лаборатории этого же Центра. Таким образом, характерными эпидемическими особенностями вспышки шигеллеза в Техасском медицинском центре, позволившими американским эпидемиологам сделать вывод об ее искусственном происхождении, были: сжатая эпидемическая кривая с пиком появления заболевших в течение 25 ч (эпидемиология «точечного источника»); «невозможная эпидемиология» — источником микроорганизмов S. dysenteriae типа 2, вызвавших данную вспышку, послужила штоковая культура Медицинского центра в Техасе; локализованность эпидемического очага — все лица, у которых обнаружен шигеллез, работали в одной лаборатории, сообщили одинаковые сведения об обстоятельствах экспозиции к возбудителю болезни.
